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食品安全

Food Safety

干货分享-食源性致病菌检测
作者:博日科技 时间:2018-11-08 13:22:49 浏览数:257

 

 

 

【民以食为天,食以安为先。随着食品产业的快速发展,食源性疾病已成为日益严重的全球性公共卫生问题之一,也是食品安全问题的首要重点。根据WHO报告,估计每年全世界有6亿人(几乎每10人中就有1人)因食用受污染的食品而患病,并有42万人死亡。5岁以下儿童的风险尤其高,每年有12.5万儿童死于食源性疾病。目前荧光 PCR 法由于其灵敏度和特异性高、无污染、重复性好等众多优点在食源性致病病原体的检测方面得到广泛应用。食源性疾病是通过摄食进入人体内的各种致病因子引起的、通常具有感染性质或中毒性质的一类疾病。包括常见的食物中毒、肠道传染病、人畜共患传染病、寄生虫病以及有毒有害物质所引起的疾病。致病因素可分为细菌性、病毒性、寄生虫、化学系和物理性等,其中以细菌性食源性疾病最为常见】

 

 

用于食品检测的各种方法

 食源性致病菌病原体检测常用方法有病原体培养法、免疫学方法、核酸检测等。病原体培养法检测周期长,灵敏度低,操作复杂,而免疫学方法抗体制备繁琐,且病原蛋白易受食品加工过程影响,特异性差,灵敏度低,而实时荧光 PCR 法由于其灵敏度高、特异性强、污染少、重复性好等优点在食源性致病病原体的定性和定量检测方面得到广泛应用。 我国出入境检验检疫行业标准 SNT1870‐2007 中规定对食品中致病菌检测方法使用荧光 PCR 方法,SN/T1632.3‐2005 中要求使用荧光 PCR 方法检测奶粉中阪崎肠杆菌检验方法。目前荧光 PCR 法已在副溶血性弧菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和和阪崎肠杆菌等检测中得到应用。

常见的细菌性食源性疾病病原体、高风险食物和其所致疾病

 

 

食源性致病菌检测解决方案:

 特点

Ø 高灵敏度:符合我国出入境检验检疫行业标准的检出要求

Ø 高特异性:以特异性基因片段设计引物和探针,结果可靠

Ø 操作简便、耗时短:试剂采用预混合形式,组分少,操作快速

Ø 开放试剂,可用于市面上各种定量PCR仪,推荐使用博日公司的定量PCR


v 实验数据

1.博日沙门氏菌核酸检测试剂盒基于Real-Time PCR技术,针对沙门氏菌特异性基因设计特异性引物和Taqman探针,主要用于对食品样品(肉制品、水果等)、水样、粪便中沙门氏菌核酸(DNA)定性检测,符合国内食品安全检测沙门氏菌的检测要求及相应国标(GB/T 4789.4-2016),试剂盒的检测灵敏度为10CFU。

 应用案例:

沙门氏菌核酸检测实验结果示例图:

 

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图1. 荧光PCR扩增曲线 图2. 荧光PCR标准曲线



 结果:根据以上荧光曲线图显示,沙门氏菌核酸检测试剂盒检测梯度浓度样本时,呈明显的梯度形式,且重复性好,灵敏度高,标准曲线各项指标均达标。


2博日大肠杆菌O157核酸检测试剂盒基于Real-Time PCR技术,针对大肠杆菌O157特异性基因设计特异性引物和Taqman探针,用于对食品样品(肉制品、水果等)中大肠杆菌O157核酸(DNA)定性检测,符合国内食品安全检测大肠杆菌的检测要求及相应国标(GB 4789.36-2016),试剂盒的检测灵敏度为50 CFU


应用案例:


梯度浓度大肠杆菌溶于溶剂中,模拟食品样本检测,进行梯度检测。


 

 

   图1. 荧光PCR扩增曲线                    图2. 荧光PCR标准曲线

 

 

结果:根据以上荧光曲线图显示,大肠杆菌O157核酸检测试剂盒检测梯度浓度样本时,呈明显的梯度形式,且重复性好,灵敏度高,标准曲线各项指标均达标。


3. 博日阪崎肠杆菌的荧光PCR检测试剂盒采用高技术树脂吸附技术,可有效避免乳品特有高蛋白以及脂肪对PCR反应的抑制以及由此引起的假阴性。 符合目前国内乳品行业阪崎肠杆菌检测要求以及相关标准(SN/T1632.3-2005),专门检测奶粉产品中阪崎肠杆菌核酸,最小检测灵敏度可达到101-1010拷贝级别。

 

 应用案例:

检测线性范围101-1010,线性范围标准梯度样本线性相关性r=1.00


 阪崎肠杆菌核酸检测实验结果示例图:

 


 样本同一实验

 

 

 

检测试剂盒

 

 


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